玫烟色棒束孢IfB01菌株原生质体制备与转化条件研究

为了提高虫生真菌玫烟色棒束孢IfB01原生质体的产量和转化效率，进而为该菌株的基因工程和细胞工程改良奠定基础，本文研究了不同细胞壁降解酶配比、渗透压稳定剂、酶解温度、时间、pH值和转速等对玫烟色棒束孢IfB01原生质体制备以及不同聚乙二醇4000（ PEG4000）浓度对原生质体转化的影响。结果显示，培养30 h的菌丝用1％蜗牛酶＋2％纤维素酶配比、以0．7 mol／L 的 NaCl 溶液（pH6．0）为渗透压稳定剂，30℃、100 r／min酶解8 h，获得的原生质体产量最高，达6．72×106个／mL；此原生质体在40％的PEG4000作用下可获得最高的转化效率，达7．05％。研究表明酶液、酶解温度、时间、pH值、渗透压、稳定剂、转速和PEG4000的浓度等因素对原生质体的制备和转化有较大影响。