重水标记法测定大鼠血浆IgG合成动力学相关参数

为测定大鼠血浆免疫球蛋白G (IgG)合成动力学相关参数,以重水(2H2O)为示踪剂,将20只SD大鼠以腹腔注射、日常饮水的形式进行2H2O标记,分别于首次标记后第1、3、5、6、10周末,各取4只大鼠,心脏穿刺采集血样,采用蛋白纯化仪纯化大鼠血液中IgG,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,将提纯的IgG水解,分离纯化IgG中丙氨酸及血浆游离丙氨酸,并衍生,用气相色谱-质谱仪(GC-MS)检测血浆IgG中2H-丙氨酰基丰度和血浆游离丙氨酸中2H丰度;计算IgG分数合成率(FSR)、合成动力学方程.结果表明:血浆IgG的FSR为14.83％·周-1,合成动力学方程为ft=0.084 1×(1-e-0.1483 t).这一研究提示2H2O标记法能有效测定血浆IgG合成动力学参数,可用于长期标记试验.