甲氨蝶呤时间治疗学在胶原诱导性关节炎大鼠中的实验研究

Chinese Journal of Rheumatology(2016)

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摘要
目的 观察胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠血清中IL-6的分泌规律,探讨根据IL-6分泌规律使用甲氨蝶呤(MTX)治疗RA的有效性与安全性.方法 用ELISA法测定CIA大鼠和正常大鼠血清中IL-6的昼夜分泌水平;CIA大鼠随机数字表法分为实验A组、实验B组和对照组,实验A组和实验B组每日1次分别在IL-6开始升高和降低时经胃管注入甲氨蝶呤(1/7 mg·kg-1·d-1),对照组每周1次注入甲氨蝶呤(每周1 mg/kg).治疗56 d,采用关节炎指数4分制评分标准评估关节炎指数,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-1β和CRP水平,电阻抗法计数外周血白细胞数量,踝关节苏木精-伊红染色病理组织切片评价CIA病理改变.采用方差分析、t检验进行统计分析.结果 CIA大鼠不同时间点IL-6分泌水平不同,6:00开始降低,18:00开始升高.治疗后实验A组关节炎指数(4.8±0.7)均较对照组(5.8±1.0,t=2.256,P=0.040 6)和实验B组(5.5±0.5,t=2.393,P=0.0313)降低.实验A组血清中TNF-α[(185±21) ng/L]、IL-6[(99±6) ng/L]、IL-1β[(20.1±1.6)ng/L]和CRP [(1251±282) μg/L]的水平均较对照组[TNF-α:(207±10) ng/L,t=2.726,P=0.016 4;IL-6:(100±6) ng/L,t=2.669,P=0.0183;IL-1β:(22.0±1.3) ng/L,t=2.814,P=0.013 8;CRP(1 417±278) μg/L,t=2.369,P=0.032 7]明显降低.实验A组IL-6浓度水平[(93±6) ng/L]较实验B组[(99±6) ng/L,t=2.323,P=0.0358]明显降低.与对照组白细胞数量[(9 650±1 062)/μl]相比,实验A组[(4 595±603)/μl,t=3.841,P=0.0064]和实验B组[(3833±585)/μl,t=4.442,P=0.003]减少明显.与对照组踝关节平均病理积分(9.1±2.0)相比,实验A组(6.6±1.3,t=2.606,P=0.015)和实验B组(7.4±1.3,t=3.857,P=0.0007)降低明显.结论 CIA大鼠血清中IL-6的分泌存在昼夜节律,6:00开始降低,18:00开始升高.甲氨蝶呤每日1次的给药方法优于每周1次给药.根据IL-6的昼夜分泌节律,在其分泌水平开始升高时给药或许可以更有效改善RA病情.
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关键词
Arthritis,rheumatoid,Chronotherapy,Methotrexate
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