TMV 和 PVX 胁迫下云烟和番茄实时荧光定量内参基因筛选

合适的内参基因是采用实时荧光定量PCR研究基因表达获得可信数据的基础。为了获得合适的内参基因，更好地研究烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus ，TMV）和马铃薯X病毒（Potato virus X ，PVX）与烟草和番茄2种寄主的互作，本项研究根据已报道的云烟和番茄看家基因设计引物，使用 geNormPlus软件分别对其在 TMV 和PVX侵染下的云烟97和番茄中表达量的稳定性进行了评估。结果表明：2种寄主植物中供试看家基因中各有4对引物满足qPCR的要求，分别是云烟 tub ，CYP ，GAPDH ，β‐tub ，番茄18S ，UK ，ACT ，EFl‐α。在2种病毒侵染后的云烟内参基因中表达最稳定的为CYP ，番茄中内参基因为ACT 。最终确定这2个看家基因分别作为实时荧光定量PCR研究烟草和番茄在TMV和PVX胁迫下寄主体内基因表达变化的内参基因。该结果为进一步探讨2种病毒共同侵染时，它们与烟草和番茄2种寄主互作生物学效应研究奠定了基础。