朱砂叶螨几丁质酶TecCht2基因的克隆及特征分析

[目的]拟克隆朱砂叶螨几丁质代谢中的关键基因几丁质酶基因,并对其进行特征分析.[方法]利用转录组拼接技术对朱砂叶螨转录组进行拼接,根据叶螨几丁质酶序列通过BLAST找到朱砂叶螨几丁质酶相似序列,设计PCR引物,进行朱砂叶螨几丁质酶基因克隆,分析其详细特征.利用SWISS MODEL预测其蛋白结构,特别是催化功能区的结构.[结果]测序分析确认为朱砂叶螨几丁质酶基因序列,并提交到GeneBank(KY705296),其开放阅读框为1 875 bp,编码624个氨基酸,C端有几丁质结合区.根据新的几丁质酶分类,判定TecCht2为Ⅵ型几丁质酶,其结构具有典型的几丁质酶结构特征.[结论]本研究克隆得到的朱砂叶螨几丁质酶基因,为今后几丁质酶功能和用于害螨防治研究奠定基础.