辣椒疫霉效应分子RxLR19781与其互作蛋白的酵母互作一对一验证

Journal of Shandong Agricultural University(Natural Science Edition)(2019)

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Abstract
辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)引起的辣椒疫病是毁灭性土传病害,短期内暴发成灾,该病害严重发生常给辣椒生产造成严重损失.植物病原卵菌分泌大量的胞内效应分子,即RxLR效应分子,能干扰寄主植物细胞的正常生理代谢和功能,在病原卵菌侵染寄主及与寄主植物互作过程发挥着重要的作用.酵母双杂交(Yeast two hybrid,Y2H)系统是研究蛋白质相互作用最常用的方法,它既可以在cDNA文库中筛选互作的未知靶标蛋白,同时还可以验证两个目的蛋白之间的互作关系.本研究分别以辣椒疫霉cDNA基因组,辣椒cDNA基因组为模板,克隆了辣椒疫霉效应因子RxLR19781以及其疑似互作蛋白泛素连接酶E210和辣椒脂质转移蛋白EARLI 1,并将它们分别成功构建到PGBKT7和PGADT7载体上.运用酵母共转化技术,将带有AD载体的互作蛋白和带有BD载体的效应因子共同转化到酵母感受态Y2HGold中,对它们是否存在互作关系进行了深入研究.结果表明,两个疑似互作蛋白都与效应因子RxLR19781互作.但由于酵母双杂交存在一定的假阳性,因此该效应分子与互作蛋白的互作有待进一步深入的研究.
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