牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的原核表达及其免疫原性
Journal of Hunan Agricultural University(Natural Sciences)（2018）
摘要
为研制检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的试剂盒,对IBRV gD蛋白主要功能域的表达及免疫原性进行研究.根据NCBI数据库录入的1型牛疱疹病毒(bovine herpesvirus type 1)gD蛋白序列(GenBank登录号为NC_001847)设计引物,用PCR扩增gD基因类免疫球蛋白结构域,构建原核表达载体pET32a-ΔgD,转化大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞,并诱导重组蛋白表达.经SDS-PAGE分析,获得了相对分子质量约43000的目的蛋白,该蛋白的相对分子质量与gD融合蛋白的理论相对分子质量一致.经镍柱纯化后,重组蛋白的质量浓度为2.5 mg/mL,纯度约为95％,Western Blot及ELISA鉴定结果显示该重组蛋白具有良好的免疫原性和反应原性,可用于IBRV抗体检测试剂盒的开发.
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