中国主要茶区茶树炭疽菌系统发育学

【目的】炭疽菌能够侵染茶树叶片并造成病叶干枯、脱落，论文旨在分离、鉴定中国主要茶区茶树炭疽病的病原菌，为茶树病害防治工作提供科学依据。【方法】利用单孢分离法对采自中国15省（市、自治区）茶区的茶树炭疽病病叶进行炭疽菌分离，并对其ITS、TUB2两个位点进行PCR扩增和测序，测序结果采用MEGA 6.0软件以邻接法（Neighbor-Joining，NJ）构建多基因位点系统发育树。对分离的菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（potato dextrose agar，PDA）上的形态特征进行描述。对龙井43和中茶108茶树品种叶片进行有伤和无伤处理后接种代表性菌株，测试其致病性。【结果】以茶树上分离的炭疽菌菌株的2个基因位点序列（ITS、TUB2）构建多基因位点系统发育树，Colletotrichum boninense CBS 123755作为外群，结果表明所有菌株聚为3支，其中45个菌株与C. camelliae聚为一族、28个与C. fructicola聚为一族、5个与C. siamense聚为一族，所有菌株均归属于C. gloeosporioides复合种，并且C. camelliae在中国茶区分布范围最广，为茶树炭疽菌的优势种。形态特征结果表明，C. camelliae在PDA培养基上生长速度平均11.8 mm·d-1，菌落白色，气生菌丝致密，绒毛状，中央凸起，边缘整齐；菌核、刚毛未见；分生孢子梗、产孢细胞未见；分生孢子透明，光滑，圆柱状，两端钝圆或基部渐尖，（8—15）μm×（3—6）μm；菌丝附着胞褐色，棍棒状，不规则状，有分枝，（8—10.5）μm×（6.5—8）μm；分生孢子附着胞未见。C. fructicola在PDA培养基上生长速率平均6.76 mm·d-1，菌落正面白色，背面中央褐色，边缘白色，气生菌丝致密，绒毛状；菌核、刚毛未见；分生孢子梗透明，有隔，具分枝，产孢细胞圆柱状，7—18μm，顶端直径1—2μm；分生孢子透明，圆柱状，两端钝圆，部分中部溢缩，（10—15）μm×（3—3.5）μm；菌丝附着胞深褐色，圆形，近圆形，不规则形，有分枝，（6.5—8）μm×（3.5—5.5）μm；分生孢子附着胞褐色或深褐色，圆形，（5—7）μm×（5—6.5）μm。C. siamense在PDA培养基上生长速率平均7.6 mm·d-1，菌落白色，气生菌丝致密，绒毛状；菌核、刚毛未见；分生孢子梗透明，有隔，具分枝；产孢细胞圆柱状，8—16μm，顶端直径1—2μm；分生孢子透明，圆柱形，梭形，两端钝圆，部分中部有溢缩，（9.5—13.5）μm×（3—3.5）μm；菌丝附着胞深褐色，球形，棒状，不规则形，（5—8）μm×（3—5.5）μm。致病性测试结果表明，C. camelliae能侵染龙井43品种茶树有伤叶片，但对龙井43无伤叶片和中茶108有伤、无伤叶片无致病性，而C. fructicola和C. siamense 2个种对2个品种茶树有伤、无伤叶片均无致病性。【结论】基于系统发育学和形态学结合的方法对中国15省（市、自治区）部分茶区茶树病叶病原菌鉴定，基本明确C. camelliae为中国茶树炭疽菌优势种。