六倍体小麦TaHKT2；2基因的克隆与多样性分析

为深入研究小麦HKT基因家族其他成员的作用,利用同源序列克隆技术和六倍体小麦基因组BAC文库克隆了小麦TaHKT2;2基因.TaHKT2;2定位于小麦第7同源群,分别命名为TaH-KT2;2-7A、TaHKT2;2-7B、TaHKT2;2-7D.TaHKT2;2与TaHKT2;1基因结构相同,均由3个外显子和2个内含子组成.在系统进化树上TaHKT2;2与TaHKT2;1聚类形成1个分支.TaHKT2;2-7A、TaHKT2;2-7B、TaHKT2;2-7D的基因编码区分别为1 602 bp、1 602 bp、1 596 bp,但利用RT-PCR技术未能在8个六倍体小麦中克隆TaHKT2;2-7D cDNA.采用克隆测序技术分析了12个六倍体小麦中TaHKT2;2的自然多样性,结果表明,TaHKT2;2-7A的序列多样性高于TaHKT2;2-7B和TaHKT2;2-7D.TaHKT2;2仅见少数碱基发生改变,在TaHKT2;2 P-loop区无氨基酸变异.TaHKT2;2 5'侧翼序列保守性低于其编码区.TaHKT2;2在小麦驯化过程可能受到选择,属于驯化基因.