荸荠组培苗在间歇浸没式生物反应器（TIBs）中的高效增殖技术

【目的】探讨间歇浸没式生物反应器（TIBs）对荸荠（Eleocharis dulcis）组培苗快速繁殖的效果，为提高荸荠组培苗繁殖效率及其工厂化生产提供技术支撑。【方法】以初代诱导培养获得的桂蹄2号荸荠组培苗为外植体，利用TIBs系统进行组培快繁，研究荸荠组培苗不同继代代数、接种密度、激素组合及反应器间歇浸没频率等因子对荸荠组培增殖的影响。【结果】经初代诱导培养的第4、5、6代继代材料增殖倍数较高，其中第6代继代苗增殖倍数最高，达31.1倍，到第7代后随继代代数的增加增殖倍数逐渐降低。当接种密度大于15丛/瓶时，外植体污染率达16.0%；当接种密度低于10丛/瓶时，外植体的污染率为0。低于10 min/6 h的间歇浸没频率有利于降低污染率，在6 h内低于15 min的浸没时间有利于降低玻璃化苗率；当激素组合为3.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA时，组培苗增殖倍数达38.5倍，且组培苗生长正常。【结论】在TIBs系统中，采用经初代诱导培养的第5代荸荠继代组培苗，增殖培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+30.0 g/L蔗糖，pH 6.0，接种密度10丛/瓶，反应器间歇浸没频率为10 min/6 h，可获得较好的培养效果。