绵羊血小板糖蛋白4基因(CD36)的克隆及在不同生长时期卵泡中的表达

[目的]血小板糖蛋白4基因(CD36)在模式动物中发挥着各种生物学功能,通过转录组数据分析,可能在绵羊卵泡发育中发挥重要作用.本研究获得了CD36基因及探究其在不同组织中表达情况,从而预测其在绵羊生长过程中可能发挥的生物学功能.[方法]实验采用PCR扩增方法获得阿勒泰羊TSP-1基因的CDS区全长,运用软件分析CD36基因的蛋白质序列及其功能区域,同时利用荧光定量PCR的方法检测5头1周岁阿勒泰羊7个组织及不同直径卵泡中的表达情况.[结果]CD36基因序列全长为1419 bp,共编码472个氨基酸,与预测序列相比完全一致.系统进化树分析表明绵羊与牛的遗传距离较近.CD36蛋白为脂溶性亲水蛋白,具有1个跨膜螺旋结构,在氨基酸1～20位存在以信号肽,存在8个N-糖基化和41个潜在的磷酸化位点,包括19个Ser,15个Thr和7个Tyr.检测不同组织和不同直径卵泡中CD36基因发现:CD36基因在绵羊7个组织中都有表达,心与肺和小卵泡中CD36表达量差异显著(P＜0.05),在不同直径卵泡中总体表达量较低.[结论]CD36基因可能在绵羊卵泡发育中发挥重要作用.