犊牛脂肪干细胞的分离、培养与鉴定
Acta Agriculturae Zhejiangensis（2019）
摘要
为给奶牛营养代谢病等相关研究提供种子细胞,本试验从犊牛肾周脂肪组织中分离出脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs),采用组织剪碎法结合0.25％Ⅰ型胶原酶消化法消化、收集原代犊牛AD-SCs,通过细胞形态学观察,使用免疫荧光染色法检测第5代ADSCs表面特异性蛋白,并使用CCK-8法测定第5、10代细胞生长曲线,观察第10代细胞的成脂、成骨分化能力.结果显示,分离出的犊牛ADSCs接种4 d后细胞呈成纤维细胞样生长;免疫荧光染色结果显示,分离的细胞Vimentin、CD34、CD44、CD90呈阳性,CD31、CD45呈阴性;该细胞在适当的诱导条件下可以定向分化为脂肪细胞和成骨细胞.本试验分离培养的细胞是犊牛脂肪干细胞,具有成脂、成骨分化能力.
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