小麦锰超氧化物歧化酶基因的克隆与原核表达

为了深入研究小麦Mn超氧化物歧化酶基因(MnSOD)的功能,采用逆转录PCR(RT-PCR)技术扩增TaMnSOD的开放阅读框(ORF)全长cDNA,对其进行生物信息学分析.结果表明,该基因开放阅读框长度为675 bp,编码224个氨基酸,蛋白相对分子量为24.56 ku,等电点为6.83.构建原核表达载体pET32a-TaMnSOD,对TaMnSOD基因进行原核表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,所表达蛋白与预测蛋白大小一致.研究结果为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.