大豆赖氨酸合成关键酶基因的克隆与定位分析

为了从大豆中克隆DAPD、DAPE和DHDPR 3个大豆赖氨酸合成关键酶基因,并完成其电子定位和结构分析,借助已构建的本地化表达序列标签(expressed sequence tag,简称EST)数据库,与不同物种的对应基因序列进行比对、拼接,同时利用已构建的大豆整合图谱,完成这3个关键酶基因的电子克隆及电子定位.结果表明,RT-PCR克隆、序列分析的结果与预测序列基本一致.通过电子定位,得到这3个基因分别在J、L和N3个连锁群上.通过对基因的结构分析,得到DAPD、DAPE、DHDPR 3个基因的cDNA长度分别为1467、1080、1035 bp,gDNA长度分别为4662、3728、3158 bp,外显子数量分别为8、9、8个,内含子数量分别为7、8、7个.研究结果为其他氨基酸合成关键酶基因的克隆提供了参考依据,也为后续基因功能研究以及分子辅助育种打下了良好基础.