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铁皮石斛总RNA提取方法的比较研究

Jiangsu Agricultural Sciences(2017)

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摘要
针对铁皮石斛富含多糖、多酚等次生代谢物质的特点,以铁皮石斛叶片为材料,比较改良CTAB-LiCl法、SDS法以及试剂盒法提取总RNA的质量,利用电泳检测、核酸蛋白仪浓度测定、RT-PCR等进行验证分析.结果表明,3种方法均能提取铁皮石斛叶片中总RNA,但提取效果存在差异.改良CTAB-LiCl法提取总RNA的28S和18S条带清晰、D600 nm/D280 nm与D260 nm/D230 nm分别为1.96和2.03,RNA完整性好、纯度高,RNA浓度在3种方法中最高,达到560.6 mg/L,RT-PCR扩增出目的基因片段条带最明显,适用于后续的分子生物学研究.
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