猪流行性腹泻病毒云南流行毒株分离与鉴定
Guizhou Agricultural Sciences(2019)
Abstract
为有效控制和预防猪流行性腹泻 (PED), 分离获得猪流行性腹泻病毒 (PEDV) 云南地方流行毒株, 并选取部分经RT-PCR鉴定为阳性的样品, 处理后接种在Vero细胞中进行分离培养, 细胞培养物盲传至15代后可观察到典型的细胞病变 (CPE), 对细胞培养物通过RT-qPCR方法检测和间接免疫荧光 (IFA) 鉴定, 并对分离株S基因全序列进行克隆和遗传进化分析.结果表明:获得的细胞培养物均为PEDV阳性, 病毒半数细胞感染量 (TCID50) 为10-4.85/0.1mL, 将其命名为YNDH-2017毒株.该分离株S基因与参考毒株的同源性为92.8%~98.2%, 和国内近年来PEDV流行毒株亲缘关系较近, 存在相同的突变位点, 而与经典毒株CV777株在两个大的分支上, 亲缘关系较远.试验分离获得的YNDH-2017株属于当前国内流行毒株.
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