发菜固氮酶nifH基因克隆及其干旱胁迫下的差异表达

Shijie WU,Lingxia WANG,Yang LIU,Fengkun YAN,Miaomiao DING,Xiaoxu LI,Wenyu LIANG

Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica（2017）

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Abstract

通过对发菜固氮酶H亚基基因(nifH)全长进行克隆、原核表达和生物信息学分析,采用qRT-PCR技术,分析不同干旱胁迫下发菜固氮酶基因nifH在转录水平的表达变化.结果表明,根据特异性引物克隆获得长度为894 bp的nifH,GenBank登陆号为BankIt1901364(KU886163).将nifH在大肠杆菌中表达,获得约36 ku的外源蛋白.生物信息学分析表明,发菜ni fH与已报道的多种蓝藻的nifH及推导的氨基酸序列具有较高的相似性,ni fH二级结构和三级结构主要由α螺旋、β-折叠、随机卷曲和β-转角构成.随藻体含水量的逐渐降低,发菜nifH在转录水平上的表达量逐渐增加,固氮酶活性呈现先增加后下降的趋势.研究结果为进一步研究发菜固氮酶基因的分子结构和发菜响应干旱胁迫的固氮机制及氮代谢过程奠定基础.

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