保加利亚乳杆菌N-乙酰胞壁质酶的原核表达和鉴定

Yuyu Zhang,Wenzheng Su,Jianjun Ma,Baohua Huang,Hui Jiang,Jiaqiang Wu,Ke Wang

Shandong Agricultural Sciences（2018）

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摘要

为研究保加利亚乳杆菌(LB)N-乙酰胞壁质酶(Mur)的分子生物学特性,根据已发表的保加利亚乳杆菌核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,PCR扩增LB MN株不含跨膜区域序列的mur基因,片段回收后克隆至pMD19-T载体并进行鉴定,再将其亚克隆于原核表达载体pET-30a(+)中构建重组表达质粒pET-30a(+)-mur,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达.SDS-PAGE和Western blot分析显示重组Mur蛋白分子量约为21 kD,能在大肠杆菌中高效表达.

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