烟草H2A的序列分析、原核表达载体构建及诱导表达

[目的]对H2A进行序列分析及蛋白结构域分析,并将其克隆入pGEX4T-1原核表达载体进行诱导表达.[方法]以pGADT7-Rec-H2A质粒为模板,通过PCR扩增烟草H2A(3 ～ 140 Aa),将其插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组载体转入BL21(DE3)中,诱导其表达.[结果]构建了烟草H2A基因全长和pGEX4T-1载体大片段连接的融合表达载体,并成功地诱导其表达.[结论]该研究为运用Pull Down确定NtTkr与候选蛋白之间的体外互作进而确定NtTkr与蛋白互作的关键结构域奠定了试验基础.