药用植物金花葵ISSR反应体系建立与优化

本试验以药用植物金花葵为研究材料,对金花葵ISSR反应体系进行优化.结果表明,最优体系为dNTP浓度为0.10 mmol/L、Taq酶浓度为0.25 U、引物浓度为0.20 mmol/L、Mg2+浓度为0.40 mmol/L、DNA浓度为50 ng;反应步骤为:94℃预变性5 min,94℃变性45 s,55℃退火55 s,72℃延伸1 min,40次循环,72℃最后延伸10 min,4℃条件下保存.本试验建立的金花葵ISSR反应体系具有稳定性好、清晰度高、多态性丰富等优点,可为今后金花葵遗传多样性研究奠定试验基础.