利用巢式PCR和荧光定量PCR比较检测猪场中感染猪肺炎支原体研究

[目的]2012年3月至12月从江苏泰州某猪场采集303份鼻拭子样品,利用巢式PCR和荧光定量PCR比较检测猪肺炎支原体的感染情况.[方法]采集7、14、21、28、30和35日龄的猪的鼻拭子,4 ℃浸泡于PBS过夜,TIANamp?细菌DNA提取试剂盒提取DNA.然后进行Mhp183的荧光定量PCR及P36的巢式PCR检测.[结果]通过巢式PCR检测,12.5％ (38/303)份样品为猪肺炎支原体阳性,用荧光定量PCR检测,50.2％(152/303)的样品为阳性.两种方法检测均为阳性的样品为22份,占7.3％,两种方法检测均为阴性的样品为127份,占41.9％.两种检测方法的感染模式相同,均在7日龄和35日龄的小猪中感染率最高,巢式PCR的感染率分别为15.6％和18.4％,荧光定量PCR的感染率分别为53.1％和56.6％.[结论]两种PCR方法均适用于猪场感染状态的检测.