温石棉诱导MeT-5A细胞恶性转化的研究

目的:研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力。方法:于2016年6月，采用乳酸脱氢酶（LDH）法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性；以5 μg/cm 2温石棉间断染毒MeT-5A细胞，24 h/次，每周一次，共28次，待细胞呈现锚着不依赖性生长后，用软琼脂集落形成试验判断细胞恶性转化，并计算软琼脂集落形成率，紫外比色法测定糖代谢过程中的关键限速酶活性，包括丙酮酸激酶（PK）、磷酸果糖激酶（PFK）和己糖激酶（HK）。 结果:温石棉对MeT-5A细胞具有细胞毒性，细胞相对存活率呈浓度依赖性下降。与未染毒时相比，10、20、40、80 μg/cm 2温石棉染毒后MeT-5A细胞相对存活率显著下降（ P<0.05）。染毒28次后，温石棉转化组细胞生长速度加快、排列紊乱，失去接触抑制，出现叠层生长，并可在软琼脂上生长，细胞集落形成率为18.33‰±2.49‰，与对照组（0）比较，差异有统计学意义（ P<0.01）；温石棉转化组细胞PK[（19.51±1.52）U/L]、PFK[（0.12±0.02）U/10 4个细胞]和HK[（0.26±0.01）U/10 4个细胞]酶活性水平高于对照组细胞[（25.00±1.04）U/L、（0.15±0.01）U/10 4个细胞和（0.33±0.01）U/10 4个细胞]（ P<0.01）。 结论:温石棉可诱导MeT-5A细胞发生恶性转化，并升高细胞糖酵解相关激酶PK、PFK、HK酶活性水平。