基于LED光催化作用的可视化生物传感新方法快速超灵敏检测microRNA-21

目的 :建立基于三交联(three-way junction,TWJ)DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感方法快速超灵敏检测microRNA-21(miRNA-21).方法 :将生物素标记的miRNA-21捕获探针固定于亲和素化的96孔板上,捕获探针能够有效的结合靶物质miRNA-21,随后加入DNA检测探针P1、P2、P3,使其自组装形成TWJ DNA纳米结构.加入SYBR Green I后,dsDNA-SYBR Green I复合物在LED光照射下可催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,其吸光度与miRNA-21浓度成明显比例关系,从而可对miRNA-21浓度进行定量检测.结果 :在最佳反应条件下,该方法最低检测限可达5.49 pmol/L,充分说明该方法具有良好的灵敏度.考察方法的精密度,相对标准偏差RSD均在7.3％ 以下.该方法的回收率在79.8～128.8％ 之间,说明该方法具有良好的精密度和回收率.结论 :本研究建立了一种基于TWJ DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感分析方法,能够快速、超灵敏检测miRNA-21.该方法为miRNA的检测提供了新思路.