工程大肠杆菌异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的诱导工艺研究

Weiqiang ZHOU,Taibo HE,Tang TANG,Weitao TANG,Zhe L(U),Yuanheng GUO,Jing WANG,Xiaoyan WANG,Chao PENG,Bo CHEN,Yi LI,Yi TONG

FAJIAO KEJI TONGXUN（2019）

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摘要

以异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase,缩写为DPEase)的工程大肠杆菌为出发菌株,在5L发酵罐培养的基础上,系统研究了大肠杆菌异源表达DPEase酶的诱导工艺.通过依次考察诱导时间点、诱导温度、诱导pH和诱导剂用量对工程大肠杆菌生长和DPEase酶活(单位时间内的转化率)的影响,综合考虑能耗和发酵周期,确定相应的最佳控制点,系统优化诱导条件.结果表明:指数生长期进行诱导,诱导前培养温度由37 ℃降至25 ℃、p H 恒定7.0 、IPTG诱导剂添加终浓度为0.5 mmol/L,可以理想平衡菌体生长和蛋白酶表达,反应30 min的DPEase酶平衡转化率达到28％左右,达到已公开报道的平均水平,为后续的生物转化工艺模索提供原料供应.

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