高效毛细管电泳指纹图谱法检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的实验研究

建立了用高效毛细管电泳指纹图谱法来检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa) 的分析方法.采用未涂层弹性熔融石英毛细管柱(93 cm×0.75 μm),有效柱长为79 cm;二极管阵列检测器;50 mbar压力进样10 s;运行电压为-30 kV;柱温为20 ℃;运行时间为60 min;考察不同检测波长、缓冲溶液种类、pH、浓度等对色谱峰的影响,并对10批样品做了相似度评价.在缓冲溶液浓度为0.2 mol·L-1、pH=5.0硼酸缓冲溶液时响应值较高,谱图效果最好;检测波长为220 nm时出峰较多、吸收好,初步建立了以25个峰为共有峰的指纹图谱.结论:25个峰的高效毛细管电泳指纹图谱共有模式可以作为全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的鉴别方法.