大肠杆菌超声波转化条件研究
Shanghai Chemical Industry（2016）
Abstract
建立了大肠杆菌的高效超声波转化方法,为利用大肠杆菌重组表达功能基因提供基础.采用超声波诱导的方法将外源DNA转化进大肠杆菌基因组中,并对大肠杆菌生长状态、超声波作用条件等影响因素进行探索.当采用0D600为0.6的菌体制备感受态细胞、超声波强度为400W、作用时间为35 min、质粒DNA质量浓度为0.2 g/L时,转化效率达到最大值,为1.3×103 CFU/μg DNA.经抽样PCR(聚合酶链式反应)鉴定,所得到的转化子均为阳性克隆.通过对超声波转化条件的优化,获得了高效转化方法.
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