培养条件及添加剂对重组荧光藻蓝蛋白β亚基胞外分泌的影响

为促进重组藻蓝蛋白的胞外分泌,该研究探索温度、诱导剂[异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprpyl-β-D-thiogalatopyranoside,IPTG)和乳糖],以及培养基添加剂(甘氨酸、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和Tween-80)对大肠杆菌胞外分泌重组螺旋藻荧光藻蓝蛋白胞β亚基(β-subunit of C-phycocyanin,CpcB)荧光强度的影响.结果表明,在25℃的条件下,重组体系表达24 h胞外培养基具有明显的CpcB荧光,且荧光强度随着表达时间的增加而逐步升高,温度是影响胞外分泌的关键因素.添加乳糖可显著增加胞外培养基CpcB的荧光强度,当用10 g/L的乳糖作为诱导剂时,荧光强度达到最大值,比未加诱导剂高5.1倍;而用IPTG作诱导剂,培养基没有明显的CpcB荧光.添加25 g/L的甘氨酸可使得胞外CpcB的荧光强度提高6.3倍,添加1.5％(体积分数)的Tween-80也可使其荧光强度提高2.5倍.荧光藻蓝蛋白的胞外分泌为改善其异源生产的效率提供便利.