Burkholderia cepacia中具有解脂作用的胆固醇酯酶的酶学特性

为了更好地应用于工业领域,系统研究Burkholderia cepacia ZWS15胆固醇酯酶(EC 3.1.1.13 cholesterol esterase,CHE)的酶学特性.通过DEAE离子交换从该菌发酵液中获得一种CHE,并探讨其有机溶剂与表面活性剂耐受性,以及底物水解特性.CHE在pH 5.5～9.0保持稳定,最适反应温度为40℃,在70℃温育2 h仍能保留70％以上的酶活,具有显著耐热性;在50％(体积分数)有机溶剂或5％(体积分数)表面活性剂存在下也具有较高酶活.飞行时间质谱鉴定该酶分子质量为37 kDa,其与胆固醇酯酶(源于洋葱伯尔霍尔德菌,Burkholderia cepacia)及脂肪酶(源于假单胞菌属,Pseudomonas sp.)具有较高匹配度.与商品化酶相比,CHE不仅具有胆固醇酯酶活性(对长链胆固醇酯类底物有明显偏好性),还具有解脂功能(可作用于三酰基甘油酯及对硝基苯酯).该酶的优良性能可为其在食品、诊断、制浆造纸等领域的工业应用提供参考与借鉴.