酵母源葡萄糖耐量因子GTF的纯化及其铬价态分析

酵母源葡萄糖耐量因子(glucose tolerance factor,GTF)可有效调节糖代谢、提高胰岛素与受体的亲和力、改善脂肪代谢.但GTF中的铬的价态不清严重限制了它在辅助降糖保健食品的中应用.实验优化了氨水联合有机溶剂提取GTF的方法.通过两级分子筛联用对GTF进行纯化,得到纯度较高的GTF.采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)联用电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)技术对GTF中铬价态进行分析鉴定.结果表明,富铬酵母粉经0.1 mol/L氨水振荡提取4h后,上清液再经30％乙醇静置20 min,离心收集上清液.该粗提液中铬含量为133 μg,铬蛋白比为5.015;相比与氨水提取法(铬蛋白比0.804),氨水联合有机溶剂法的铬蛋白比提高了6倍,提取效率提高极大.GTF粗提液再经两级葡聚糖凝胶层析柱分离纯化,得到了一个与铬峰重合的蛋白峰.利用HPLC-ICP-MS对其进行铬价态分析,图谱显示GTF样品中铬出峰的时间为31 ～90 s,出峰时间与Cr(Ⅲ)的出峰时间一致,有且只有一个铬峰,GTF中的铬是以Cr(Ⅲ)形态存在,无Cr(Ⅵ)存在.该结果为GTF保健食品或安全膳食铬补充剂的开发提供了理论依据.