探究乳粉中阪崎肠杆菌活菌检测方法灵敏度和检出限

目的 探究乳粉中阪崎肠杆菌活菌检测的灵敏度和最低检出线的实时荧光逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法.方法 将羊奶粉作为基质,根据GB 4789.40-2016中第一法中规定的增菌方法 ,一组加入10CFU阪崎肠杆菌,另一组加入等量的阪崎肠杆菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、普通变形杆菌、粪肠球菌,培养时间分别设置为15 h和18 h,将不同培养时间的培养物分别取1 mL进行RNA提取,以cDNA为模板进行扩增.结果 增菌培养18 h后,提取RNA采用实时荧光RT-PCR技术,结果显示扩增曲线良好,Ct值稳定.结论 乳粉中阪崎肠杆菌活菌检测,增菌培养18 h后,采用实时荧光RT-PCR,最低可检出10 CFU的阪崎肠杆菌.