林蛙油提取物对过氧化氢诱导MC3T3-E1损伤的保护

目的 研究林蛙油提取物(rana oil extract,ROE)对过氧化氢致小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)损伤的保护作用.方法 采用MTT方法检测细胞活力,筛选林蛙油提取物促MC3T3-E1细胞生长的最佳给药浓度和时间,Western blotting法检测骨形态发生蛋白-2(BMP2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin)、Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达.应用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测骨生长相关基因的表达.结果 经过MTT法筛选,400 μg/mL、24 h为ROE的最佳给药浓度及时间,与空白对照组比较,模型对照组MC3T3-E1细胞ALP蛋白表达水平降低(P＜0.05),Runx2、BMP2、Osteocalcin表达明显降低(P＜0.01).与模型对照组比较,ROE给药组中ALP、BMP2蛋白表达水平升高(P＜0.05)Osteocalcin、Runx2蛋白表达水平明显升高(P＜0.01),与空白组比较,模型组ALP、Runx2、BMP2基因表达均下调(P＜0.05),Osteocalcin显著下调(P＜0.01);与模型组比较,ROE给药组ALP、Runx2基因表达均上调(P＜0.05),BMP2、Osteocalcin基因表达显著下调(P＜0.01).结论 ROE可以调控骨代谢基因和蛋白的表达水平,对H2O2损伤的MC3T3-E1老年型骨质疏松模型有一定的保护作用.