双启动寡核苷酸聚合酶链式反应法检测食品中的沙门氏菌

目的 建立检测食品中沙门氏菌的双启动寡核苷酸-聚合酶链式反应(dual priming oligonucleotide-polymerase chain reaction,DPO-PCR)方法.方法 以沙门氏菌invA基因为靶基因设计一对DPO引物,优化条件,对180份熟肉样本同时进行DPO-PCR和细菌分离鉴定.结果 DPO-PCR方法退火温度在52、57、62℃均可对靶基因高效扩增.方法特异性好,仅对沙门氏菌为阳性结果,而对金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157∶H7、β溶血性链球菌、铜绿假单孢菌无交叉反应.方法灵敏度可达4.3× 102 CFU/mL.与细菌分离鉴定相比,两者检测结果完全一致.结论 该方法快速、精准,可作为食品中沙门氏菌的快速检测方法.