C-5固醇去饱和酶ERG3对酿酒酵母耐盐性的影响

为阐明酿酒酵母固醇与耐盐特性的关系,构建麦角固醇合成关键基因ERG3敲除菌株Bs-1;平板验证发现,Bs-1在60 g/L NaC1-酵母浸出粉胨葡萄糖(yeast extract peptone dextrose,YPD)平板上菌落生长被抑制,在80 g/L NaC1-YPD平板上完全不能生长;运用气相色谱-质谱联用检测菌株中固醇的种类和含量,发现Bs-1不能合成麦角固醇,却合成了5,6-二氢麦角固醇.此外,分析Bs-1和野生菌株BY4741的代谢发现,在60 g/LNaCI-YPD中,Bs-1的最大OD600nm为5.56±0.30,比BY4741降低了45％;Bs-1的最高乙醇产量为(4.20±0.00) g/L,比BY4741降低了35％;在盐胁迫条件下,Bs-1与BY4741相比会产生大量胞外甘油,但细胞对甘油的保留能力却减弱.结果 表明酵母中固醇种类的变化影响了细胞代谢特性和细胞膜的流动性,造成细胞胞内甘油外排增加,导致细胞耐盐性降低.