烟酰胺核糖对酒精暴露小鼠抑郁样行为及肠黏膜通透性改善效果

目的:探讨烟酰胺核糖(nicotinamide riboside,NR)作为一种营养补充剂对酒精暴露小鼠抑郁样行为及肠黏膜通透性的改善效果.方法:30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组(10只/组),对照组和模型组每天给予0.2 mL生理盐水灌胃,NR干预组(NR组)每天给予400 mg/kg mb NR灌胃.每周一至周四上午8时至下午16时给予模型组和NR组小鼠新鲜配制的体积分数15％乙醇水溶液自由饮用,下午16时至次日上午8时给予其自来水自由饮用;对照组小鼠全天给予自来水自由饮用,周五、六切断3组小鼠一切水源,周日给予3组小鼠自来水自由饮用.干预期间3组小鼠自由进食,实验持续10周.采用旷场实验、糖水偏好实验和强迫游泳实验评价小鼠抑郁样行为;苏木精-伊红染色观察小鼠海马组织CA1区病理学改变;酶联免疫吸附实验检测各组小鼠血清中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)质量浓度;采用透射电子显微镜对小鼠空肠和结肠组织细胞连接装置超微结构进行观察;采用示踪实验观察小鼠空肠和结肠组织渗透性;免疫印迹实验检测小鼠空肠和结肠组织中紧密连接蛋白occludin及ZO-1表达水平.结果:与对照组和NR组相比,模型组小鼠在旷场实验的总运动距离和中央区域停留时间缩短,糖水偏爱度明显下降,同时,强迫游泳实验中模型组不动时间达到(168.6±34.4)s,较对照组((107.9±47.4)s)显著延长(P<0.05);NR干预后,其抑郁样行为较模型组明显改善.模型组小鼠海马CA1区出现部分神经细胞损伤,血清BDNF水平达到(438.9±46.7)pg/mL,较对照组((638.1±77.3)pg/mL)显著降低(P<0.05);NR干预后,神经细胞损伤得到一定程度修复,血清BDNF水平达到(735.7±55.7)pg/mL,较模型组显著升高(P<0.05).模型组小鼠血清LPS水平达到(22.5±1.8)ng/mL,与对照组((13.2±3.0)ng/mL)相比显著升高(P<0.05);其空肠和结肠黏膜上皮紧密连接和中间连接等细胞连接装置发生形态学异常改变;示踪实验结果显示,与对照组比较,模型组小鼠空肠和结肠组织渗透性增加;Western blot结果发现,与对照组比较,模型组小鼠空肠及结肠occludin、ZO-l蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).NR干预后,小鼠血清LPS水平降低,达到(17.5±0.3)ng/mL,空肠及结肠组织渗透性及细胞连接装置得到明显改善和修复,occludin和ZO-l蛋白表达水平亦发生不同程度上调.结论:NR可有效缓解酒精暴露小鼠抑郁样行为,其作用机制可能与NR对酒精性抑郁小鼠肠黏膜通透性的修复作用有关.