乳源酪蛋白糖巨肽作用人结肠癌细胞HT-29调控炎症活力研究
Food Science(2017)
Abstract
为进一步阐释乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)的抗炎及修复肠道炎症的功效,本研究在确定了乳源CGMP对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的结肠癌细胞HT-29NF-κB亚单位p65蛋白的影响和乳源CGMP调控核转录因子(nuclear factor,NF)-κB信号通路的基础上,通过构建表达乳源CGMP和NF-κB必需调节蛋白(NF-κB essential modulator,NEMO)的质粒,共转HT-29细胞,免疫共沉淀测定两个蛋白的相互作用.最后采用线粒体膜电位法测定乳源CGMP对HT-29细胞的促凋亡作用.结果表明,乳源CGMP与NEMO (NF-κB essential modulator) 30h共转HT-29细胞中,乳源CGMP与NEMO蛋白均表达,且表现出二者的相互作用.乳源CGMP可与NEMO相互作用影响NF-κB信号通路;同时乳源CGMP还促进HT-29细胞凋亡,呈时间依赖性,其中0.1 tg/mL的CGMP作用效果最好.乳源CGMP与NEMO相互作用是间接作用于IκB激酶(IκB kinase,IKK)而作用于IκB,进而影响NF-κB信号通路.研究揭示了乳源CGMP调控NF-κB信号通路的另一种途径,也充分说明乳源CGMP可通过作用多种抗炎途径发挥其调控作用.
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