酪蛋白糖巨肽对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响

采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)分析不同剂量酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响,揭示乳源CGMP是否有增殖肠道关键益生菌的功能.选用50只健康BALB/c小鼠,随机分为对照组,安慰组(灌胃生理盐水0.2 mL),乳源CGMP低、中、高剂量组(灌胃等体积不同质量浓度的乳源CGMP),灌胃周期为2周.于灌胃后第0、3、5、7、9、11、15天及停止灌胃后1周(第21天)采集的小鼠新鲜粪便,并进行粪便菌体基因组DNA抽提.依据双歧杆菌的16S rRNA基因序列设计5对种属特异性引物,以两歧双歧杆菌(Bifidobcteriumbifidum)CICC6071的基因组DNA作为标准品,进行梯度稀释制作标准曲线;分析样品PCR扩增产物的熔解曲线,评价反应的特异性.结果表明:Real-time PCR可准确定量小鼠肠道内双歧杆菌数量;且灌胃中剂量乳源CGMP可以促进小鼠肠道内双歧杆菌的增殖,在灌胃第11天时小鼠肠道内双歧杆菌数量达到最高值,即乳源CGMP对小鼠肠道双歧杆菌的增殖作用存在剂量选择性.