嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1 Hsp33基因的克隆及结构分析

以嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothernophilus) GL-1为研究对象,通过聚合酶链式反应(PCR扩增获得该菌株的热休克蛋白33 (Hsp 33)基因,通过ExPASy、SOPMA、Pymol等在线软件对其进行生物信息学分析.同时,考察热胁迫处理对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长的影响,并利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)研究菌株在热胁迫中Hsp33基因的表达情况.结果 表明,通过PCR扩增得到碱基长度为876bp的Hsp33基因,该基因与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1 vzy的Hsp33基因序列相似性达到99％,其表达的蛋白质结构与Bacillus subtilis 1 vzy的Hsp33蛋白具有相似的核心结构域,二者除C-末端稍有不同外,具有相同的β-折叠和α-螺旋,无卷曲螺旋.热胁迫对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长具有影响,当菌株受到热胁迫时,Hsp33基因表达量增加,说明在受到热胁迫时,Hsp33蛋白作出了应激反应.