丝蛋白肽醒酒活性组分分离纯化及其构效关系研究

以废蚕丝为原料,采用40％CaCl2溶液将其溶解、透析后得蚕丝蛋白,优化其酶解工艺条件,并将制得的丝蛋白肽经凝胶过滤色谱(HPGFC)和反相液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,利用瓦勒-霍赫法考察了不同浓度和组分丝蛋白肽的体外醒酒活性.结果表明,最佳蚕丝蛋白酶解工艺条件为时间240 min、加酶量([E]/[S])2.0％、pH 8.5、温度60℃、底物浓度5％,该工艺下可获得水解度为23.22％的丝蛋白肽;体外醒酒活性试验表明有较高ADH激活率的丝蛋白肽浓度为2 mg/mL;经HPGFC和RP-HPLC分离纯化,可分别得到3个和17个组分,其中SFP-Ⅱ-8组分体外醒酒活性最高,其ADH激活率可达44.51％;将SFP-Ⅱ-8组分通过液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用分析(UPLC-Q-TOF-MS)后得出其氨基酸序列为L-G-GV-G-A.