京尼平交联制备枯草杆菌碱性蛋白酶聚集体

本研究利用新型交联剂京尼平制备了枯草杆菌碱性蛋白酶交联聚集体(BAP-CLEAs).以酶活回收率为指标,确定了BAP-CLEAs制备的最佳条件为:交联剂质量浓度0.50％,交联温度35℃,交联时间12h,此时BAP-CLEAs的酶活回收率为55.04％.采用扫描电镜及红外光谱对BAP-CLEAs进行表征,结果证明枯草杆菌碱性蛋白酶在京尼平的作用下成功交联.与游离酶相比,BAP-CLEAs的最适pH值向碱性方向偏移,由9.4变为10.3,在较宽的pH范围和温度范围内保持较高的酶活.另外,在2％浓度的酪蛋白底物中重复使用5次后,BAP-CLEAs还能保持86.42％的酶活性.以上催化特性的结果表明,枯草杆菌碱性蛋白酶在京尼平的作用下可成功交联形成酶聚集体,且该交联酶聚集体具有比游离酶更优越的pH稳定性、温度稳定性和重复使用稳定性,有良好的工业应用前景.