产β-葡聚糖酶耐盐鲁氏酵母的筛选及鉴定

从农家自制辣椒酱中分离纯化了一株耐盐酵母,通过β-1,3葡聚糖酶鉴定(刚果红染色法)确定其具有合成、分泌胞外β-1,3葡聚糖酶特性.NaC1耐受性研究确定其具有高耐盐性,能经144h的适应期后在24％ NaC1的培养基B中稳定生长120 h.经26s rRNA基因序列分析鉴定为鲁氏酵母A(Z.Rouxii A).Z.Rouxii A发酵培养中存在二次生长现象,其生物量在24h和48h达到峰值,分别比18h的6.38 g/L提高了46.55％和87.15％,而21h后葡萄糖浓度仅维持在1.57 g/L左右,说明:Z.Rouxii A生长过程中合成、分泌的β-葡聚糖酶持续降解发酵培养基中恭加的β-1,3-1,6-葡聚糖,为其二次生长提供了碳源和能源.Z.Rouxii A的β-1,3-葡聚糖酶活性曲线与生长曲线基本趋势一致,最大酶活性随着菌体自溶(12h、24h和48h)而迅速降低,48h达到酶活峰值15.23 U/mL,说明:Z.Rouxii A的β-1,3-葡聚糖酶合成与细胞生长偶联.以上数据确认该菌为产β-葡聚糖酶高耐盐鲁氏酵母.