酒鬼酒窖池酒醅芽孢杆菌的系统发育分析和胞外酶学特征

从酒鬼酒窖池中采集成熟酒醅样品,用纯培养法进行芽孢杆菌分离纯化,采用16S rRNA基因序列分析法进行系统发育分析,采用水解法对其胞外酶学特征进行观察.采用NA和LA培养基分离纯化得到104株细菌菌株,根据形态特征和产芽孢特征,去除部分冗余,选择28株代表性芽孢杆菌用于进一步研究.系统发育分析结果表明,这28株芽孢杆菌具有较高的类群多样性和物种多样性,属于细菌域(Bacteria)厚壁菌门(Firmicutes)的2个科(Bacillaceae、Paenibacillaceae)的3个属(Bacillus、Brevibacil-lus、Virgibacillus),分为10个物种.芽孢杆菌属(Bacillus)占绝对优势,共26株(92.9％);其余2株JSM 161009和JSM 166025分属于枝芽孢杆菌属(Virgibacillus)和短芽孢杆菌属(Brevibacillus).胞外水解酶学特征观察结果表明,至少产生一种酶的菌株共27株(96.4％).其中有20株(71.4％)淀粉水解酶阳性,19株(67.9％)明胶水解酶阳性,27株(96.4％)尿素水解酶阳性,21株(75.0％)对4种吐温(20、40、60、80)之一水解活性阳性.在28株受试菌株中,有8株(JSM 161009、163010、163017、166014、167011、167021、168017、168019)水解酶谱较广.这8个菌株均属于芽孢杆菌科(Bacillaceae),其中1株(JSM 161009)属于枝芽孢杆菌属(Virgibacillus),其他7株属于芽孢杆菌属(Bacillus).