实时荧光环介导等温扩增技术检测熏肉中单增李斯特氏菌的研究

建立一种实时荧光环介导等温扩增方法(Real-Time Fluorescence Loop-mediated Isothermal Amplification,RTF-LAMP)来快速、灵敏地检测熏肉中单增李斯特氏菌.针对单增李斯特氏菌的特异性基因inl B设计4条LAMP引物,并建立一套最优的RTF-LAMP反应体系.对该方法进行特异性验证,同时对灵敏度和人工污染熏肉的检出限进行测定.3株单增李斯特氏菌被检测为阳性,17株非单增李斯特氏菌为阴性.表明引物具有良好的特异性.RTF-LAMP和传统LAMP检测单增李斯特氏菌的灵敏度分别为1.1×101、1.1×102 CFU/m L.通过对熏肉进行人工污染,得出RTF-LAMP的检出限为3.5×101 CFU/g.通过与国标方法GB 4789.30—2016进行对比并计算RTF-LAMP反应的敏感性,特异性和准确度,结果分别为100.00％、98.44％和98.46％.研究建立的RTF-LAMP能够实时、快速地检测熏肉中单增李斯特氏菌,具有良好的应用前景.