分蘖洋葱冰结构蛋白的提取及鉴定

以耐寒性较好的东北分蘖洋葱为原料,利用冰结合磷酸缓冲溶液法,提取分蘖洋葱冰结构蛋白.采用单因素和响应曲面法,考察了磷酸缓冲液(PBS)的浓度、料液比及冰球数量对冰结构蛋白提取率的影响.确定最佳参数为:分蘖洋葱滤汁与PBS溶液的体积比为1∶5.32,PBS浓度为91.87 mmol/L,冰球添加量为33个/100 mL.在此条件下,AISPs的提取率达到65.23％.经全波长紫外扫描,在280 nm处有最大吸收峰.利用SDS-PAGE确定其分子量为52,29,22,15 kDa.将AISPs添加到耐低糖酵母菌悬液中,当添加量为1.0％、冻融周期为5 d/次时,酵母菌的活菌数最高,菌落数为6.73×10 5个,存活率为51.45％,分别比对照组提高了88.5％和25.56％,说明AISPs具有很好的抗冻保护活性.