缺氧诱导基因2诱导甘油三酯堆积稳态失衡促进肝癌发生的研究
Translational Medicine Journal(2020)
Abstract
目的 探讨缺氧诱导基因2(hypoxia-inducible gene 2,HIG2)在肝癌发生发展中的作用和意义.方法 正常肝细胞(QZG)、肝癌细胞系(HepG2、SMMC7721)常规培养,采用Western Blot法检测HIG2蛋白的表达水平;通过甘油三酯检测试剂盒检测每6×106个正常肝细胞系(QZG)和肝癌细胞系(HepG2、SMMC7721)甘油三酯含量;使用涂有Matrigel的聚碳酸酯膜的Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力,划痕实验比较转染了对照质粒以及转染了HIG2过表达质粒的HepG2细胞的细胞迁移率;实时定量荧光PCR分析30例肝癌组织和对应肝癌癌旁组织中HIG2蛋白的表达;免疫组织化学方法检测肝癌癌旁组织和肝癌组织中HIG2蛋白的表达及部位.结果 肝癌细胞系HepG2和SMMC7721比正常肝细胞系QZG中HIG2蛋白水平增加(P<0.05),同时肝癌细胞系HepG2和SMMC7721甘油三酯含量[(16.94±0.33)mg/dL,(16.04±1.02)mg/dL]均显著高于正常肝细胞系QZG[(4.90±0.39)mg/dL],差异比较具有统计学意义(P<0.05);与转染对照质粒组比较,HIG2的过表达质粒显著增加了HepG2细胞的迁移率和划痕愈合百分比(P<0.05);实时定量荧光PCR结果显示与肝癌癌旁组织比较,肝癌组织中HIG2的丰度增加(P<0.05);Western Blot结果显示与肝癌癌旁组织比较,肝癌组织中HIG2蛋白水平增加(P<0.05);免疫组化显示HIG2在肝癌组织中高表达且主要在胞浆中.结论 HIG2蛋白可以显著诱导肝癌细胞的甘油三酯的堆积,同时促进了肝癌细胞的侵袭和转移潜力.
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