前列腺小体外泌蛋白ELISA检测方法的建立和初步评价

目的 建立前列腺小体外泌蛋白ELISA检测方法并评价其作为慢性前列腺炎辅助诊断的可行性.方法 从慢性前列腺炎患者尿液中提取并纯化前列腺小体外泌蛋白,以纯化的前列腺小体外泌蛋白为抗原免疫实验BALB/c小鼠,得到单克隆抗体经过纯化后,建立ELISA检测方法.并对笔者所在医院的140例慢性前列腺炎患者尿液及正常人60例尿液中的前列腺小体外泌蛋白含量进行检测和评价.通过正交试验确定特异性抗体和酶标抗体的最佳工作浓度,并对试剂盒进行了4℃,12个月保存实验.确定该检测方法的临界值.结果 慢性前列腺炎症患者尿液中前列腺小体外泌蛋白含量明显高于正常人尿液中含量,有显著性差异(Z=10.74,P＜0.05).实验室临界值为1.24 ng/ml.在140份慢性前列腺炎患者尿样中,阳性率为88.5％;特异性为90％.将前列腺小体外泌蛋白试剂盒测定结果与临床金标准比较[Kappa=0.75(95％CI=0.652 to 0.848),P＜0.01],该检测试剂盒与临床金标准有高度一致性.试剂盒各个成分在低温保存12个月可以保持稳定.结论 前列腺小体外泌蛋白的检测试剂盒灵敏度高,特异性强,稳定性合格,可以为临床前列腺炎诊断提供可靠的依据.