树状大分子包裹的纳米金颗粒载体人铁蛋白重链转染自然杀伤细胞92和磁共振成像

目的 以聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体,将人铁蛋白重链(FTH1)转染到自然杀伤细胞92(NK92细胞)中,并进行体外细胞MRI检查.方法 将第5代聚酰胺-胺树状大分子用聚乙二醇(PEG)修饰之后包裹纳米金颗粒作为非病毒载体,压缩FTH1报告基因然后转染到NK92细胞内.应用磁共振氢谱、紫外分光光度计和透射电子显微镜等对合成的载体材料进行表征;采用琼脂糖凝胶电泳实验确定载体材料与相应基因之间最佳压缩的氮磷比;应用细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)检测载体材料的毒性;通过测定水动力粒径来确定不同氮磷比的条件下载体材料和基因形成的复合物能否顺利通过细胞膜;应用荧光显微镜和流式细胞仪测定转染效率;应用3.0T的MRI对转染FTH1的NK92细胞进行体外成像.结果 合成的聚乙二醇化的包裹纳米金颗粒的树状大分子{ (Au0) 25-G5.NH2-mPEG17} DENPs具有较好的生物相容性,材料细胞毒性较小,在浓度达到3 000 nmol/L时细胞存活率仍然能达到60％以上.荧光显微镜和流式细胞仪测定显示,在氮磷比为1∶1、2∶1、5∶1、10∶1时,转染效率分别为57.8％、64.0％、80.2％、38.3％.在200和500 μmol/L枸橼酸铁铵的条件下,MRI检查发现T2加权像(T2WI)的信号均降低,后者更为明显.结论 聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒能够成功地转染目的基因,MRI检查能有效地在体外检测FTH1转染之后的NK92细胞,为MRI活体示踪自然杀伤细胞过继免疫肿瘤治疗奠定了基础.