Tfh细胞在重症肌无力患者胸腺中的表达及作用机制

目的 探讨Tfh细胞在重症肌无力(MG)患者胸腺中乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)产生中的作用及机制.方法 收集28例MG患者、9例无胸腺异常的先天性心脏病患者和9例未合并MG的胸腺增生患者.采用流式细胞术检测胸腺中滤泡辅助T(Tfh)细胞和B细胞的比例,分别通过RT-PCR和Western-Blotting技术检测胸腺中Th1、Th2和Tfh细胞特异性转录因子T-bet、GATA-3、Bcl-6 mRNA水平和细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IL-21表达;采用HE和多标免疫荧光染色观察胸腺中生发中心以及Tfh细胞和B细胞之间的组织结构关系;采用放射免疫沉淀技术(RIA)检测MG患者胸腺和血清中AChR-Ab滴度;免疫磁珠提取胸腺中Tfh细胞和B细胞共培养,检测培养上清中IL-21和AChR-Ab滴度水平.结果 MG患者胸腺中Tfh细胞和B细胞比例及Tfh细胞相关转录因子Bcl-6 mRNA水平和细胞因子IL-21表达均较对照组增高(P＜0.01);MG患者胸腺中抗AChR-Ab滴度较对照组增高(P＜0.01);MG患者胸腺中存在异位生发中心,且在生发中心内Tfh细胞和B细胞存在共定位;MG患者胸腺Tfh和B细胞共培养上清中IL-21和AChR-Ab水平较对照组增多(P＜0.01),且AChR-Ab产生可以被IL-21中和抗体阻断.结论 Tfh细胞通过在MG患者胸腺中辅助B细胞形成异位生发中心及促进抗AChR-Ab产生参与MG的发生和发展.