白藜芦醇对糖尿病大鼠肾皮质氧化应激损伤的保护作用

目的 探讨白藜芦醇对糖尿病大鼠肾皮质蛋白烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、葡萄糖调节蛋白78( GRP78)表达的影响,以研究白藜芦醇对糖尿病大鼠肾皮质氧化应激损伤的保护作用.方法 将15只SD雄性大鼠应用链脲佐菌素(STZ)制造糖尿病大鼠模型.13周后将造模成功的12只大鼠随机分为糖尿病组(DM组,n=6)和白藜芦醇干预组(DR,n=6),以6只健康SD大鼠作为对照组(NC组).DR组大鼠给予白藜芦醇10 mg·kg-1·d-1每日固定时间连续灌胃2周,DM组用等体积0.5％羧甲基纤维素钠溶液灌胃,至第14周结束.第14周结束时,检测3组大鼠的血糖、体重、血肌酐、血尿素氮、24 h尿微量白蛋白.取肾组织,制石蜡切片做PAS染色观察肾小球肾小管形态学变化.取10％肾皮质组织匀浆后测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平.Western blotting法检测肾皮质NOX4和GRP78蛋白表达的改变.结果 与NC组相比,DM组大鼠血糖、血肌酐、血尿素氮、24 h尿微量白蛋白均显著升高(t=- 52.324、- 20.487、- 20.724、- 55.476,均P＜0.0167),而体重则明显下降(t=5.820,P ＜0.0167)；白藜芦醇干预后,DR组大鼠24 h尿微量白蛋白、血肌酐、血尿素氮均比DM组呈好转趋势(t=13.963、7.849、8.678,均P＜0.0167)；而DR组体重和血糖与DM组相比差异无统计学意义(t=-1.767、1.876,均P＞0.0167).与NC组相比,DM组MDA水平明显增加(t=- 10.661,P＜0.0167),而SOD、CAT水平降低(t=8.124、8.222,均P＜0.0167)；而与DM组相比,DR组SOD水平升高(t=- 12.309,p＜0.0167),MDA水平降低(t=4.475,P＜0.0167),2组CAT活力差异无统计学意义(t=-3.029,P＞0.0167).肾脏组织PAS染色显示NC组大鼠基底膜完整无增厚,DM组大鼠肾小球系膜基质增多,系膜细胞增生,DR组则较DM组减轻.Western blotting显示DM组血管组织中NOX4及GRP78蛋白表达上调(0.49±0.05、1.47±0.04),均高于对照组NC组(0.09±0.001、0.84±0.012,t=- 14.255、-25.179,均P＜ 0.0167)；DR组NOX4蛋白表达(0.30 ±0.073)仍高于NC组(t=-5.125,P＜0.0167)；GRP78蛋白(0.60 ±0.034)则低于NC组(t=- 28.017,P＜0.0167).结论 糖尿病大鼠肾皮质上存在着明显的氧化应激损伤,白藜芦醇可能通过抑制GRP78蛋白的表达从而影响内质网应激,抑制NOX4蛋白的表达减轻氧化应激对糖尿病大鼠早期肾脏损害.