胡黄连苷Ⅱ抑制大鼠脑缺血再灌注损伤后线粒体细胞色素C的表达及意义研究

目的 探讨胡黄连苷Ⅱ抑制大鼠脑缺血再灌注损伤后线粒体细胞色素C(CytC)的表达及意义. 方法 Wistar大鼠96只按随机数字表法分为假手术组、模型组、胡黄连苷Ⅱ组、CytC特异性抑制剂环孢素(CsA)组、CsA+胡黄连苷Ⅱ组、CytC选择性激动剂苍术苷(Atr)组、Atr+胡黄连苷Ⅱ组、DMSO组,每组12只.采用改良Longa法制备缺血2h再灌注24h模型,并按分组给予相应干预.各组大鼠在再灌注24 h后行改良神经功能缺损评分(mNSS),采用ELISA法检测脑组织活性氧(ROS)含量,采用HE染色观察神经细胞形态,采用电镜观察线粒体超微结构,采用TUNEL法检测神经细胞凋亡情况,采用免疫组化染色和Westem blotting检测CytC表达水平. 结果 模型组大鼠与假手术组比较,mNSS评分升高,ROS含量增高,皮质区变性细胞数增多,线粒体结构破坏严重,神经细胞凋亡数和CytC蛋白表达增多,差异均有统计学意义(P＜0.05).胡黄连苷Ⅱ组大鼠与模型组比较,mNSS评分下降,ROS含量降低,皮质区变性细胞数减少,线粒体损伤程度减轻,神经细胞凋亡数和CytC蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).Atr+胡黄连苷Ⅱ组与Atr组比较,mNSS评分下降,ROS含量降低,变性细胞数及神经细胞凋亡数减少,线粒体损伤程度减轻,CytC蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 胡黄连苷Ⅱ对局灶性脑缺血再灌注损伤可产生神经保护作用,机制可能与清除ROS、下调CytC蛋白表达和保护细胞线粒体结构有关.