组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制神经胶质瘤细胞增殖的机制研究

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制神经胶质瘤细胞株增殖的机制. 方法 分别用0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 μmol/L曲古菌素A(TSA)处理U251细胞48 h,0.5 μmol/L TSA处理细胞8、16、24、36、48 h,1μmol/L M344、0.5 μmol/L LBH589、6 mmol/L NaBu、6 mmol/L VPA处理细胞48 h,对照组加入等量溶剂,MTT法检测细胞存活率;Western blotting检测0.5 μmol/L TSA处理U251细胞8、16、24 h后c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK (p-JNK)蛋白的表达;Westernblotting、MTT法分别检测对照组、10 μmol/L SP600125组和1μmol/L CEP11004组细胞c-Jun、p-c-Jun蛋白的表达和细胞存活率;Western blotting、MTT法分别检测转染pcDNA3.1组、转染pcDNA3.1 +TSA组、转染pMKK7-JNK1组、转染pMKK7-JNK1 +TSA组细胞p-c-Jun、Flag蛋白的表达和细胞存活率. 结果 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 μmol/L TSA组细胞存活率低于对照组,且TSA浓度越高,细胞存活率越低,半数抑制浓度(IC50)为0.5μmol/L;0.5 μmol/L TSA处理16、24、36、48 h后细胞存活率低于对照组,且处理时间越长,细胞存活率越低;1 μmol/L M344、0.5 μmol/L LBH589、6 mmol/L NaBu、6 mmol/L VPA组细胞存活率低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).0.5 μmol/L TSA处理16h和24 h后细胞p-JNK蛋白水平显著降低;10 μμmol/L SP600125、1μmol/L CEP11004组细胞p-c-Jun蛋白的表达降低;10 μmol/L SP600125、1μmol/L CEP11004组细胞存活率低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);与转染pcDNA3.1组比较、转染pMKK7-JNK1组细胞存活率增加,与转染pcDNA3.1 +TSA组比较,转染pMKK7-JNK1 +TSA组细胞存活率增加,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制神经胶质瘤增殖的机制包含抑制JNK活性.